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猫科兽医世界名著(之八)

文字:[大][中][小] 手机页面二维码 2018/8/14     浏览次数:    



校刊导语

为了营造良好的同行互动研讨氛围,加强课外自学专研,CSAVS自费组织专业兽医师翻译了著名小动物临床兽医文献(暂时以猫科和骨科为主)供大家参考讨论,抛砖引玉,欢迎更多的执业兽医师同行投入到继续教育和终身学习中,与世界兽医共同进步!

我们将定期在CSAVS公众号无偿发布部分基础内容,将给老学员的邮箱无偿发送部分进阶内容,以馈同行,感恩学员和一路上相伴的新老朋友!

注:所选的文献书籍均为CSAVS签约讲师著作,CSAVS尊重原作者版权,所有译文不得用于任何商业用途,仅供内部交流!


怀疑幼猫感染性腹泻的诊断

面对急需扭转结果的需求,幼猫中广泛认可的肠道致病菌数量及对成本控制需求增加,因此需要明智地进行粪便检测。全面的临床和流行病学评估必须定义疾病的严重程度和类型(如发热、出血性腹泻、医院感染、炎症性白细胞像),暴露(旅行史,生食或未煮熟的肉类产品,接触病患,最近是否使用抗生素),以及确定动物或主人是否存在免疫缺陷,有助于粪便测试和优化抗菌素治疗。




了解不同粪便检查技术的适应症和局限性,对于优化幼猫感染性腹泻的诊断至关重要。在所有腹泻幼猫中应考虑用于肠道寄生虫诊断的粪便检查技术包括:粪便直接滴片法检查原生动物贾第鞭毛虫的滋养体和三毛滴虫;通过离心的粪便漂浮法来检测寄生中卵囊,囊和卵细胞;粪便涂片的抗酸染色可以评估隐孢子虫属卵囊;贾第虫属的粪便ELISA、DFA和隐孢子虫属的DFA。使用Wright-Giemsa或Diff-Quik染色粪便涂片可以评估内生孢子、弯曲杆菌样微生物和白细胞,诊断作用有限。可在结肠炎或便秘的猫中进行直肠刮取物评估结肠直肠粘膜炎症细胞、肿瘤细胞或感染因子。三毛滴虫的粪便培养比较费时,且比市售的粪便PCR敏感度低。稍后将介绍离心的粪便漂浮,肠病原菌的粪便培养,粪便免疫分析和粪便PCR的详细概述。作者不提倡使用苏丹IV染色剂进行粪便脂肪评估,因为该测试非常不敏感和非特异性。


通过离心的粪便漂浮

通过粪便漂浮试验可以找到粪便中的囊、卵囊和卵细胞。已经描述了不同的漂浮程序,但并非所有都提供了寄生虫鉴定的最佳条件。例如,离心的持续时间和速度以及离心后盖玻片置于管上的时间都是很重要的。

应尽可能检查新鲜粪便,或将新鲜标本冷藏不超过72h,通过浓缩技术检测囊,卵囊或卵细胞。如果评估将推迟超过72h,可以将新鲜粪便放入10%的福尔马林溶液中。福尔马林固定的标本适用于浓缩技术,抗酸染色和免疫分析。虽然站立(重力)漂浮方法比离心漂浮更容易和快速(图1-11),但后者显然具有更高的敏感性(可达8倍)。如果采用重力漂浮法,粪便中寄生虫少可能会产生假阴性结果。粪便漂浮法有局限性,不应该用来检测不能漂浮的重卵(吸虫属)或幼虫(猫圆线虫属)。

图1-11:用自由摆动的离心机,在离心前放置一个盖玻片


所使用的漂浮溶液类型及其比重是重要的考虑因素。作者推荐具有比重为1.18或1.20的硫酸锌用于漂浮试验。这种溶液和比重对卵细胞和贾第虫卵囊是最佳选择,同时保留了贾第虫卵囊的结构细节。


离心漂浮试验的操作步骤





补充

使用固定角度的离心机并且没有自由摇摆的离心管时,应遵循上述程序,但离心管需要从顶部填充1英寸左右,最后旋转时不添加盖玻片。当最后的离心步骤完成时,将试管小心地放置在试管架中。使用移液管轻轻地将额外的漂浮溶液沿管的侧壁加进去,同时尽可能少地扰乱粪便内容物。出现凸弯月面并在顶部放置盖玻片。放置10min。吧盖玻片取下放置于载玻片上,并按照步骤8中所述进行检查。


肠道病原菌的培养

由于对腹泻犬猫进行粪便肠道检查的适应症定义不清,导致不加区别地测试和结果误解。艰难梭状芽胞杆菌、产气荚膜梭菌、弯曲杆菌属和沙门氏菌属的粪便培养可能耗时且不敏感。另外,分离假定的细菌肠病原体并不表示因果关系。作者不鼓励使用细菌培养分离产气荚膜梭状芽胞杆菌和艰难梭状芽胞杆菌,因为两种肠病原体分别基于肠毒素和毒素的检测而不常与疾病相关,所述有机体具有可疑的致病性,分离可能需要长达72h。大多数临床医师喜欢使用实时PCR检测沙门氏菌属以及用于区分非致病性弯曲杆菌属致病的病原体。大多数区域性兽医参考实验室能够使用基于分子的方法来区分弯曲杆菌属。


寄生虫,病毒和细菌肠道致病菌PCR检测

诊断贾第虫属感染一般通过粪便漂浮法,滴片法和粪便抗原检测(ELISA或DFA)的结合诊断。由于粪便中的PCR抑制剂,贾第虫的粪便PCR检测可能有假阴性结果,并且PCR不应该用作该生物体的筛选工具。常规进行PCR的大型商业参考实验室已纳入大量对照组以确保操作中每一步的质量:定量DNA / RNA对照组以评估每个临床样品的质量,提取对照组每个DNA / RNA提取循环以确保没有污染,和内部阳性和阴性对照以验证每个实时PCR检测的最佳性能和没有污染。贾第虫属PCR检测的主要适应症是用于确定感染物种是否是人畜共患病集合物。后者测定可以在科罗拉多州立大学兽医诊断实验室(http://dLab.colostate.edu/)进行。这种PCR检测不同于在商业参考实验室进行的猫腹泻实时PCR检测(IDEXX Laboratories,Westbrook,Maine)或猫胃肠道快速PCR检测(Antech Diagnostics,Irvine,California)。PCR可用于诊断幼猫隐孢子虫属,然而作者更喜欢采用DFA检测可以在荧光显微镜下直接观察卵囊。C. felis和C. canis的检测并不能证明谁是引起临床疾病的原因。粪便PCR检测推荐用于诊断猫三毛滴虫感染。然而,猫三毛滴虫的DNA可以在健康猫携带者中检测到,所以阳性结果必须结合动物病史,体检检查和环境进行解释。PCR是检测沙门氏菌属和弯曲杆菌属DNA的敏感方法,但如前所述,阳性结果并不一定需要抗生素治疗。在猫中,粪便PCR检测梭菌属的阳性预测值低,最好与毒素免疫分析结合使用以提高诊断率。逆转录酶-PCR用于检测粪便中的冠状病毒RNA,然而阳性检测结果并不能区分FECV和FIP诱导菌株,并且健康非腹泻猫的冠状病毒发病率很高。

临床医师有责任意识到每个粪便诊断测试的局限性和益处,并认识到仅仅检测粪便中假定的肠病原体的DNA或检测贾第鞭毛虫属包囊或隐孢子虫属卵囊并不能说明因果关系。应该认识到,一只幼猫表现出结肠炎迹象(里急后重,便血,粪便黏液增加,粪便量小,频率明显增加)并且粪便漂浮或ELISA检测证明贾第鞭毛虫属感染,这只猫应该还有另一个引起结肠炎症状的原因,因为贾第鞭毛虫是一种小肠病原体。应进一步调查小猫结肠炎的已知病因(例如三毛滴虫、弯曲杆菌属、产气荚膜梭菌、艰难梭状杆菌和食物不耐受)。


  今天给大家分享的是“怀疑幼猫感染性腹泻诊断”的一些研究结果。明天将给大家分享对幼猫不明原因腹泻的经验性治疗的相关知识,请持续关注公众号!


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